تشخیص لیستریا مونوسیتوژنز در مواد غذایی به روش مولکولی pcr

thesis
abstract

چکیده سابقه و هدف: لیستریا مونوسیتوژنز یک باکتری گرم مثبت، پاتوژن داخل سلولی اختیاری و علت وقوع مسمومیت های غذایی و همچنین عامل بیماری های شدید در گروه های آسیب پذیر جامعه انسانی می باشد. روش استاندارد برای تشخیص این باکتری کشت میکروبی بوده که این روش بیشتر از 36 ساعت طول می کشد. لذا دست یابی به آزمونی که بتواند در هر شرایطی وجود این باکتری را در نمونه بالینی نشان دهنده، ارزشمند است .لیستریوزیز یکی از مهم ترین بیماری های منتقله از طریق مواد غذائی است. شناسایی سریع و دقیق این باکتری در پیشگیری از موارد عفونت نقش زیادی دارد. هدف از این تحقیق تشخیص سریع مولکولی این میکروارگانیسم با استفاده از ژن hlya به روش مولکولی ,pcr semi-nested pcr می باشد. مواد و روش ها: ابتدا نمونه در محیط مغذی کشت شد و سپس dnaاستخراج و با استفاده از روش pcrمورد ارزیابی قرارگرفت محصول pcrتوسط semi-nested pcr بررسی گردید. ژن hlya به عنوان ژن اختصاصی برای شناسایی لیستریا مونوسیتوژنز انتخاب و از سویه استاندارد لیستریا مونوسیتوژنز ptcc no 1163 استفاده شد. برای بررسی اختصاصیت از باکتری های دیگر مثل کلبسیلا پنومونیه 13883 atcc،3218atcc e.coli ، سالمونلا تیفی 1609 atcc، 25922 e.coli atcc، استافیلوکوکوس آرئوس 25923ptcc و برای استخراج dna از roche kit: cat no. 11 796 828 1 استفاده شد پس از الکترفورز در ژل آگارز 2/1% در دمای اتاق با اتیدیم بروماید رنگ آمیزی و مورد تایید قرار گرفت. محصول pcr، مجدداًpcr شد. یافته ها: در تعیین حساسیت این روش مشخص شد که شناسایی 103 × 6/1 از باکتری در ماده ی غذایی امکان پذیر می باشد. که در همه موارد نتیجه منفی بود. طی pcr اولیه قطعه 200 جفت بازی و در pcr دوم قطعه 138 جفت بازی semi-nested pcr تکثیر گردید. بحث و پیشنهاد: روش مولکولی به کار رفته در این مطالعه از سرعت حساسیت و اختصاصیت لازم برخوردار است و نتیجه گیری نهایی در3 تا 5 ساعت به دست می آید. به کارگیری این روش در آزمایشگاه ها، تشخیص سریع لیستریا مونوسیتوژنز را ممکن می-سازد. واژه های کلیدی: لیستریا مونوسیتوژنز ، ماده غذایی ،pcr، hlya، semi-nested pcr

First 15 pages

Signup for downloading 15 first pages

Already have an account?login

similar resources

بررسی فراوانی ژن ctpA در باکتری های لیستریا مونوسیتوژنز جدا شده از طیور به روش PCR

سابقه و هدف: لیستریا مونوسیتوژنز توانایی ایجاد عفونت در انسان و حدود 50 گونه از حیوانات را دارد. گوشت و فرآورده های گوشتی نقش بالقوه ای در انتقال لیستریا به انسان دارند و باعث ایجاد بیماری لیستریوز می گردند. هدف از این مطالعه تعیین میزان آلودگی طیور به لیستریا مونوسیتوژنز و بررسی فراوانی ژن ctpA می باشد. مواد و روش ها: این پژوهش به صورت مقطعی-توصیفی بر روی 410 نمونه جمع آوری شده از طیور در شهر...

full text

جداسازی و تشخیص لیستریا مونوسیتوژنز در نمونه های واژن به روش pcr

هدف: لیستریا مونوسیتوژنز باکتری بی هوازی اختیاری و گرم مثبت است که در خاک، آب، سبزیجات پوسیده، شیر خام و محصولات لبنی آلوده یافت می شود. لیستریا مونوسیتوژنز عامل بیماری لیستریوز است. این بیماری از طریق مدفوع یا لبنیات آلوده از حیوان به انسان منتقل می شود. این باکتری باعث بیماری شبه سرماخوردگی یا انتریت خود محدود شونده می شود. اما در سالمندان، نوزادان، زنان باردار و افرادی که نقص سیستم ایمنی دار...

full text

بررسی فراوانی ژن ctpA در باکتری های لیستریا مونوسیتوژنز جدا شده از طیور به روش PCR

سابقه و هدف: لیستریا مونوسیتوژنز توانایی ایجاد عفونت در انسان و حدود 50 گونه از حیوانات را دارد. گوشت و فرآورده های گوشتی نقش بالقوه ای در انتقال لیستریا به انسان دارند و باعث ایجاد بیماری لیستریوز می گردند. هدف از این مطالعه تعیین میزان آلودگی طیور به لیستریا مونوسیتوژنز و بررسی فراوانی ژن ctpA می باشد. مواد و روش ها: این پژوهش به صورت مقطعی-توصیفی بر روی 410 نمونه جمع آوری شده از طیور در شهر...

full text

شناسایی لیستریا مونوسیتوژنز از شیر خام به روش های کشت سلولی و PCR ژن actA

مواد غذایی از راه های مختلفی در معرض آلودگی میکروبی قرار می گیرد. یکی از باکتری های بیماری زا که از طریق مواد غذایی از جمله: شیر خام، سبزیجات به انسان منتقل می شود، باکتری لیستریا مونوسایتوژنز است که باعث بیماری های مختلفی از جمله: مننژیت، کنژونکتیویت، سپتی سمی و سقط جنین می باشد. با توجه به گزارشاتی که از آلودگی های شیر و فرآورده های آن به لیستریا مونوسایتوژنز داریم، به خصوص در کشورهای در حال ...

full text

بررسی حضور ژن prf A در لیستریا مونوسیتوژنز جداسازی شده از مواد غذایی

  زمینه: لیستریا باکتری گرم مثبت و درون سلولی اختیاریست که از طریق غذا انتقال می­یابد. ژن prf A تنظیم­کننده بیان سایر ژن­های بیماری­زاست و در بیماری­زایی باکتری نقش دارد.   هدف: مطالعه به منظور تعیین حضور ژن prf A در لیستریا مونوسیتوژنز جداسازی شده از مواد غذایی مختلف انجام شد.   مواد و روش­ها: این مطالعه تحلیلی در سال 1391 بر روی 212 نمونه غذایی مختلف جمع­آوری شده از شهرهای مختلف انجام شد. لیس...

full text

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


document type: thesis

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه پیام نور - دانشگاه پیام نور استان تهران - دانشکده علوم پایه

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023